PfAgo蛋白说明书
【产品名称】PfAgo蛋白 【表达系统】E.coil
【性 质】重组蛋白 【分子量】90.4 kDa
【产品信息】：
PfAgo核酸内切酶(PfAgoEndonuclease)来源于重组大肠杆菌，含有从嗜热古细菌Pyrococcus furiosus中克隆的Argonaute (Ago)核酸酶基因，是一种基于引导序列(guide DNA)与靶核酸碱基互补配对，继而特异识别并剪切靶核酸的核酸内切酶。PfAgo 利用小的5′-磷酸化的guide DNA (大于15 nt)，在95°C下精准切割单链和双链 DNA 靶标，剪切位点位于与引导序列互补的5’端开始的第10和11个核苷酸之间剪切不受靶标序列和剪切位点相邻序列限制。
本产品的PfAgo核酸酶，克隆自嗜热古细菌Pyrococcus furiosus，在大肠杆菌中表达，为N端含6xHis标签的融合蛋白。
【产品内容】：
名称 | 数量 | 浓度 | 储存温度 |
PfAgo | 200 μL | 10 µM | -20℃ |
PfAgo Reaction Buffer | 3 × 1 mL | - | -20℃ |
PfAgo Diluent Buffer | 2 × 1 mL | - | -20℃ |
长时间保存建议储存-80℃，短期储藏于-20℃.
按照使用次数及时分装，避免反复冻融。
试用装特别说明
蛋白的浓度均为1mg/mL
Pf Ago蛋白试用装包含蛋白溶液和反应缓冲液，蛋白稀释液用无酶水，自备。
【反应体系】：
示例：
成分名称 | 体积/µL | 终浓度 |
Nuclease-free water | 18 | |
PfAgo Reaction Buffer | 3 | 1× |
4 µM gDNA(21nt) | 3 | 400 nM |
10 µM PfAgo | 3 | 1 µM |
Total Reaction Volume | 27 µL | |
注：该比例仅供参考，可根据具体实验调整比例。
1.使用蛋白稀释液稀释蛋白。
2.在95℃条件下，预孵育10分钟进行预组装
3.加入3µL的1 µM底物DNA（终体积30 µL），充分混匀，95℃孵育30~60分钟
4.使用20%聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分析。
【注意事项】
1.本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.请严格按照基因扩增实验室的管理规范进行实验操作，注意防止扩增产物污染。
3.实验结束后，检测过程中所产生的废弃物应按照相关规范进行处理。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并